Bakterier i petriskål

Børnevidenskab: Sådan kultiveres mikroorganismer i en petriplade Har du nogensinde haft lyst til at kultivere mikroorganismer som del af et videnskabeligt forsøg eller blot for underholdningens skyld? Processen er forbavsende ukompliceret - alt, hvad der kræves, er et passende næringsagar, som er et særligt geléagtigt substrat til vækst, samt et antal sterile petriplader og nogle potentielt virkningsfulde kilder til bakterier!

Første afsnit af tre: Klargøring af petripladerne 1 Klargør agarblandingen. Agar er den geléagtige substans, der anvendes til kultivering af mikroorganismer. Dette materiale fremstilles af en bestemt type rødalger, og det udgør en fortrinlig overflade for vækst af adskillige bakteriearter. Visse agarvarianter indeholder yderligere næringsstoffer, såsom fåreblod, der bidrager til at fremme en mere robust bakterievækst.

Den mest tilgængelige agarvariant til dette eksperiment er en næringsagar, som leveres i pulveriseret form. Du bør anvende den mængde agar, der er nødvendig, dog ikke under 1,2 gram agarpulver per 10 centimeters (3,9 tommer) petriplade, du påtænker at benytte. I en varmeresistent beholder omrøres 1,2 gram (ca. ½ teskefuld) næringsagarpulver i 60 ml (0,25 kop) varmt vand.

Multiplicer disse mængder i forhold til antallet af petriplader, du agter at anvende. Anbring beholderen i mikrobølgeovnen og opvarm i 1 minut, mens du overvåger for at forhindre agaropløsningen i at koge over. Når blandingen er færdig, skal agarpulveret være fuldstændigt opløst, og væsken skal fremstå transparent. Tillad agaropløsningen at afkøle i adskillige minutter, før du fortsætter.

Petriplader er små beholdere med flad bund, fremstillet af transparent glas eller plast. De består af to dele - en øvre og en nedre - som passer tæt sammen. Denne konstruktion beskytter indholdet mod uønsket kontamineret luft, men muliggør samtidig, at gasser produceret af bakterierne kan undslippe. Petriplader skal være fuldstændigt steriliserede, før de benyttes til bakteriekultivering; i modsat fald kan forsøgets resultater blive kompromitterede.

Nyligt indkøbte petriplader bør leveres steriliserede og hermetisk forseglet i plastindpakning. Tag petripladen ud af emballagen, og adskil de to komponenter. Arbejd i nærheden af en høj stearinlysflamme eller en Bunsenbrænder for at minimere kontamination. Placer hurtigt den øverste del af petripladen tilbage for at forhindre, at luftbårne mikroorganismer forurener forsøget.

Lad petripladerne stå i 30 minutter til 2 timer, indtil agaropløsningen er afkølet og størknet; når den er klar, vil den have en konsistens, der minder om stivnet gelé. Såfremt du ikke agter at anvende de agarfyldte petriplader umiddelbart, bør de opbevares i køleskabet, indtil du er klar til at fortsætte eksperimentet.

Opbevaring af petripladerne i køleskabet forebygger, at vandet i pladerne fordamper, da bakterier kræver et fugtigt miljø for at trives. Når petriplader opbevares i køleskabet, skal de vendes på hovedet. Dette bidrager til at forhindre kondensvand på låget i at dryppe ned og forstyrre den vækstflade. Agarfyldte petriplader kan holde sig i køleskabet i op til adskillige måneder.

Når du er parat til at anvende dem, fjernes de fra køleskabet og tillades at opnå stuetemperatur, før dine prøver introduceres. Andet afsnit af tre: Kultivering af bakterier 1 Indfør bakterier i petripladerne. Når agaropløsningen er størknet, og petripladerne har nået stuetemperatur, er du klar til den spændende fase - introduktionen af mikroorganismerne. Der eksisterer et par tilgange til at udføre dette - enten via direkte berøring eller gennem opsamling af prøver.

Direkte berøring: Denne metode involverer overførsel af bakterier til petripladen ved hjælp af umiddelbar kontakt, f.eks. En hyppig fremgangsmåde er at trykke let med fingerspidsen - enten før eller efter håndvask - mod agarens overflade. Anvend en steriliseret vatpind, hvis en sådan er tilgængelig. Lad din kreativitet råde! Prøveopsamling: Med denne teknik kan du indsamle bakterier fra næsten enhver overflade og overføre dem til petripladen; alt du behøver er nogle rene bomuldspinde.

Disse områder er ofte rige på bakterier og burde give anledning til både fascinerende og potentielt frastødende resultater inden for få dage. Om ønsket kan du anbringe mere end én bakterieprøve i hver petriplade - det eneste, du skal gøre, er at opdele pladen i kvadranter (kvarterer) og indføre en separat bakterieprøve i hver af disse. Det anbefales at holde én kvadrant af petripladen fri for bakterieprøver for at benytte den som kontrolgruppe.

Når bakterierne er introduceret, skal du sætte låget på petripladen igen og forsegle det med parafilm eller husholdningsfilm. Husk at mærke hver petriplade med information om bakteriernes oprindelse; ellers vil det være umuligt at skelne mellem dem. Dette kan gøres ved hjælp af tape og en tuschpen. Som en yderligere sikkerhedsforanstaltning kan du anbringe hver petriplade i en genlukkelig pose.

Dette vil tilføje et ekstra beskyttelseslag mod potentielt skadelige bakteriekolonier, der måtte udvikle sig, samtidig med at det fortsat giver mulighed for at observere petripladens indhold. Anbring petripladerne et varmt, mørkt sted, hvor bakterierne kan udvikle sig uforstyrret i adskillige dage. Husk at opbevare pladen vendt nedad, så bakterievæksten ikke forstyrres af kondensdråber.

Den optimale temperatur for kultivering af bakterier ligger mellem 70 og 98 grader Fahrenheit (21 og 37 grader Celsius). Hvis det er nødvendigt, kan du anbringe petripladerne et køligere sted, men bakterievæksten vil da ske betydeligt langsommere. Tillad bakterierne at udvikle sig i flere dage, da dette giver kulturen tilstrækkelig tid til at formere sig.

Når bakterierne påbegynder deres vækst, vil du muligvis bemærke en karakteristisk lugt fra pladen. Efter nogle få dage vil du observere et forbløffende spektrum af bakterier, skimmelsvampe og andre svampe, der trives i hver petriplade. Anvend en notesbog til at nedfælde dine observationer vedrørende indholdet af hver plade og eventuelt drage en konklusion om, hvilke steder der udviste den største bakterieforekomst.

Fjernbetjeningens knapper? Resultaterne kan meget vel forbløffe dig! Dette vil assistere dig med at optælle og dokumentere dataene. En fascinerende variant af dette eksperiment er at indføre et antibakterielt stof (f.eks. håndsprit, sæbe) i petripladen for at vurdere dets virkningsgrad. Efterhånden som bakterierne i pladen vokser, vil du observere en ring eller "glorie" omkring det område, hvor det antibakterielle middel blev anbragt, et sted hvor ingen bakterier trives.

Dette fænomen benævnes "dræbszonen" eller, mere præcist, "inhibitionszonen". Jo større inhibitionszonen er, desto mere potent er det antibakterielle middel. Tredje afsnit af tre: Forsvarlig destruktion af bakterierne 1 Træf de korrekte sikkerhedsforanstaltninger. Inden du påbegynder bortskaffelsen af dine petriplader, er det essentielt at iværksætte de påkrævede sikkerhedsforanstaltninger.

Selvom de fleste mikroorganismer, du kultiverer, sandsynligvis er ufarlige, kan store bakteriekolonier udgøre en forøget risiko - derfor skal de destrueres før bortskaffelse ved anvendelse af almindeligt husholdningsblegemiddel. Beskyt dine hænder mod blegemidlet ved at iføre dig gummihandsker, skærm dine øjne med beskyttelsesbriller af plast, og beskyt dit tøj ved at bære et forklæde.

Dæk åbne sår med gummihandsker, og undgå at indtage eller inhalere bakterierne, mens de vokser. Åbn petripladen, og hæld forsigtigt en lille mængde blegemiddel direkte oven på bakteriekolonierne, mens du holder pladen over en vask. Denne handling vil tilintetgøre mikroorganismerne. Vær yderst omhyggelig med ikke at lade blegemidlet komme i kontakt med din hud, da det kan forårsage ætsninger.

Herefter anbringes den desinficerede petriplade i en genlukkelig plastikpose, hvorefter posen bortskaffes i affaldsbeholderen.